一、项目简介
常染色体隐性遗传脊髓小脑性共济失调20（SCAR20）是由SNX14基因突变所致的一种神经发育障碍疾病，主要在婴儿期发病，病死率和病残率较高。目前除了对症治疗以外，暂无有效的治疗手段。基于腺相关病毒（AAV）的基因疗法可以通过单次给药长期表达目的基因，现已应用于多种罕见病的治疗。本研究拟构建不同启动子的AAV9-SNX14，通过Western blot、CCK8检测SNX14基因在HT22、HEK293细胞中的表达以及细胞存活情况，完成对最适启动子的筛选。其次，基于具有共济失调表型的SNX14f/f Nestin-Cre的条件性敲除小鼠模型，评价AAV9-SNX14对SCAR20的疗效。通过行为学检测、HE染色、免疫组化和Western blot等实验技术评估AAV9- SNX14对小鼠的运动和肌肉能力、浦肯野细胞的生存率、自噬溶酶体功能以及神经炎症反应的恢复作用。再次，对AAV9-SNX14进行安全性评价。最后，通过代谢组学和蛋白质组学检测不同处理组的代谢物、差异蛋白；通过分析代谢通路上下游的相关分子，进一步探索潜在的药物作用机制。本研究将为AAV9-SNX14在SCAR20的临床应用提供治疗依据，为SCAR20治疗药物的开发提供新的思路。
二、项目研究者
罗光佐 中国医科大学健康科学研究院教授
三、项目期限
2024年1月-2025年12月
四、项目预算
28万元
五、项目进展
截至2025年1月，已经构建及筛选不同启动子的基因表达质粒；成功制备并纯化AAV9-hSyn-SNX14 病毒；利用AAV9病毒载体递送SNX14基因在SNX14-cKO小鼠模型中初步获得良好作用效果。